蛋白质糖基化，即碳水化合物与多肽链的共价连接，是涉及许多基本生理过程的非常重要的翻译后修饰。全面的位点特异性和定量分析对于揭示糖基化的不同功能和动态至关重要。为了表征完整的糖肽，基于质谱 (MS) 的糖蛋白组学采用多种碎裂方法，其中电子转移/高能碰撞解离 (EThcD) 已广受欢迎。然而，EThcD 在碎裂低电荷离子方面的固有局限性阻碍了其广泛应用。此外，需要为具有大量样本的比较糖蛋白组学开发高通量策略。在此，我们开发了等压N, N-二甲基亮氨酸衍生的乙二胺 (DiLeuEN) 标签可增加糖肽的电荷状态，从而提高裂解效率并允许深入分析完整的糖肽，尤其是唾液酸糖肽。此外，在串联 MS 谱图中生成的 DiLeuEN 标记糖肽的独特报告离子能够在单次分析中对多达四个样品进行相对定量，这代表了一种新的高通量定量糖蛋白组学方法。



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