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在基因工程大肠杆菌中高效生产功能性母乳低聚糖 3'-唾液酸乳糖
ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2022-07-08 , DOI: 10.1021/acssynbio.2c00243
Jiameng Zhang 1 , Yingying Zhu 1 , Wenli Zhang 1 , Wanmeng Mu 1, 2
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3'-唾液酸乳糖 (3'-SL) 是最重要和最简单的唾液酸化母乳低聚糖之一。在这项研究中,基于质粒的途径优化以及染色体整合策略被应用于 3'-SL 生产。具体而言,将前体CMP-Neu5Ac合成通路基因和α2,3-唾液酸转移酶编码基因导入大肠杆菌BL21(DE3)ΔlacZ 实现3'-SL合成。基因nanAnanK进一步删除参与 Neu5Ac 分解代谢的基因,以减少竞争途径的代谢通量。选择了来自不同物种的几种 α2,3-唾液酸转移酶来评估唾液酸化作用。通过优化参与 UDP-GlcNAc 和 CMP-Neu5Ac 合成途径的关键酶表达来平衡和改进前体库。最后,将额外的 α2,3-唾液酸转移酶表达盒整合到染色体中以最大化 3'-SL 合成,并在摇瓶水平产生 4.5 g/L 细胞外 3'-SL。在 5 L 生物反应器发酵中,细胞外 3'-SL 浓度提高到 23.1 g/L,这是迄今为止报道的最高细胞外值。



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更新日期:2022-07-08
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