Conventional SPPS (solid-phase peptide synthesis) requires protecting the nucleophilic side-chains of amino acids to prevent undesired modifications. A large volume of TFA (trifluoroacetic acid) is generally needed to remove these protecting groups after the peptide assembly. Such a process significantly lowers the productivity of the subject peptide manufacture due to handling large volumes of TFA and the resultant anti-solvent for precipitating and isolating the crude products. Enabling the side-chain unprotected amino acid couplings should break through such a bottleneck in peptide production and drastically increase productivity. Fmoc-Arg-OH, Fmoc-His-OH, and Fmoc-Tyr-OH are utilized in this study as substrates to investigate their couplings to peptide molecules. Side reactions induced by these side-chain unprotected amino acids have been elucidated, and solutions addressing these side reactions are developed. The processes of the side-chain unprotected amino acid couplings have been successfully implemented in peptide synthesis through a minimal-protection SPPS (MP-SPPS) strategy. Significantly reduced TFA concentration was enabled to quantitatively detach the peptide from the solid support and obtain the crude peptide product in high yield. In this process, trifluorotoluene, an alternative solvent to DCM (dichloromethane) with low toxicity, was employed as the medium for TFA-mediated peptide cleavage and side-chain global deprotection. A crude peptide product with high purity was obtained from the MP-SPPS process, and a 5.3-fold productivity increase was accomplished.

中文翻译：

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侧链无保护的 Fmoc-Arg/His/Tyr-OH 偶联及其在通过最小保护/绿色化学策略进行固相肽合成中的应用

传统的 SPPS（固相肽合成）需要保护氨基酸的亲核侧链以防止不希望的修饰。在肽组装后，通常需要大量的 TFA（三氟乙酸）来去除这些保护基团。由于处理大量的 TFA 和用于沉淀和分离粗产物的所得反溶剂，这种方法显着降低了主题肽制造的生产率。启用侧链未受保护的氨基酸偶联应该可以突破肽生产中的这一瓶颈，并大大提高生产力。Fmoc-Arg-OH、Fmoc-His-OH 和 Fmoc-Tyr-OH 在本研究中用作底物来研究它们与肽分子的偶联。已经阐明了由这些侧链未受保护的氨基酸引起的副反应，并开发了解决这些副反应的解决方案。侧链未受保护的氨基酸偶联过程已通过最小保护 SPPS (MP-SPPS) 策略成功地用于肽合成。显着降低的 TFA 浓度能够使肽从固体支持物上定量分离并以高产率获得粗肽产物。在这个过程中，三氟甲苯是一种低毒性的 DCM（二氯甲烷）的替代溶剂，被用作 TFA 介导的肽裂解和侧链全局脱保护的介质。MP-SPPS工艺获得了高纯度的粗肽产物，产率提高了5.3倍。并开发了解决这些副反应的解决方案。侧链未受保护的氨基酸偶联过程已通过最小保护 SPPS (MP-SPPS) 策略成功地用于肽合成。显着降低的 TFA 浓度能够使肽从固体支持物上定量分离并以高产率获得粗肽产物。在这个过程中，三氟甲苯是一种低毒性的 DCM（二氯甲烷）的替代溶剂，被用作 TFA 介导的肽裂解和侧链全局脱保护的介质。MP-SPPS工艺获得了高纯度的粗肽产物，产率提高了5.3倍。并开发了解决这些副反应的解决方案。侧链未受保护的氨基酸偶联过程已通过最小保护 SPPS (MP-SPPS) 策略成功地用于肽合成。显着降低的 TFA 浓度能够使肽从固体支持物上定量分离并以高产率获得粗肽产物。在这个过程中，三氟甲苯是一种低毒性的 DCM（二氯甲烷）的替代溶剂，被用作 TFA 介导的肽裂解和侧链全局脱保护的介质。MP-SPPS工艺获得了高纯度的粗肽产物，产率提高了5.3倍。侧链未受保护的氨基酸偶联过程已通过最小保护 SPPS (MP-SPPS) 策略成功地用于肽合成。显着降低的 TFA 浓度能够使肽从固体支持物上定量分离并以高产率获得粗肽产物。在这个过程中，三氟甲苯是一种低毒性的 DCM（二氯甲烷）的替代溶剂，被用作 TFA 介导的肽裂解和侧链全局脱保护的介质。MP-SPPS工艺获得了高纯度的粗肽产物，产率提高了5.3倍。侧链未受保护的氨基酸偶联过程已通过最小保护 SPPS (MP-SPPS) 策略成功地用于肽合成。显着降低的 TFA 浓度能够使肽从固体支持物上定量分离并以高产率获得粗肽产物。在这个过程中，三氟甲苯是一种低毒性的 DCM（二氯甲烷）的替代溶剂，被用作 TFA 介导的肽裂解和侧链全局脱保护的介质。MP-SPPS工艺获得了高纯度的粗肽产物，产率提高了5.3倍。显着降低的 TFA 浓度能够使肽从固体支持物上定量分离并以高产率获得粗肽产物。在这个过程中，三氟甲苯是一种低毒性的 DCM（二氯甲烷）的替代溶剂，被用作 TFA 介导的肽裂解和侧链全局脱保护的介质。MP-SPPS工艺获得了高纯度的粗肽产物，产率提高了5.3倍。显着降低的 TFA 浓度能够使肽从固体支持物上定量分离并以高产率获得粗肽产物。在这个过程中，三氟甲苯是一种低毒性的 DCM（二氯甲烷）的替代溶剂，被用作 TFA 介导的肽裂解和侧链全局脱保护的介质。MP-SPPS工艺获得了高纯度的粗肽产物，产率提高了5.3倍。