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探索乙酸转运蛋白家族的功能和结构
Free Radical Biology and Medicine ( IF 7.1 ) Pub Date : 2018-05-01 , DOI: 10.1016/j.freeradbiomed.2018.04.389
João Azevedo-Silva , David Ribas , Davide Castagnoli , Joana Sá-Pessoa , Diogo Athayde , Isabel Soares-Silva , Margarida Archer , Margarida Casal

AceTr 转运蛋白家族是一组具有六个预测跨膜片段的醋酸盐转运蛋白。它在真菌、细菌、古细菌和原生动物中具有同源物。作为醋酸盐转运蛋白,这些蛋白质在细胞代谢中起着至关重要的作用,涉及细胞适应营养供应的能力。由于这些膜转运蛋白还转运其他底物,因此它们可能是生物技术目的的重要资产。为了更好地了解乙酸盐转运的机制,我们研究了 AceTr 家族的功能和结构特征。我们已经对来自酿酒酵母 Ady2 的高度保守或可能参与底物结合的残基进行了定点诱变。功能测定确定了这些残基对转运能力和蛋白质定位的影响。这项工作的另一个目标是确定 AceTr 家族的结构。因此,它的几个成员被克隆到不同的表达载体中,并在不同的大肠杆菌表达菌株中评估了它们的表达。来自大肠杆菌的 SatP 及其来自 Methanosarcina acetivorans 的 AceP 的蛋白质生产水平令人满意,目前正在生产、纯化和结晶试验中进行测试。



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更新日期:2018-05-01
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