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Cre/lox 介导的生物合成基因簇染色体整合用于构巢曲霉异源表达
ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2022-02-16 , DOI: 10.1021/acssynbio.1c00458 Indra Roux 1 , Yit-Heng Chooi 1
ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2022-02-16 , DOI: 10.1021/acssynbio.1c00458 Indra Roux 1 , Yit-Heng Chooi 1
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构建用于大型生物合成途径的长期稳定异源表达的丝状真菌菌株受到当前方法的低转化效率或遗传稳定性的限制。在这里，我们开发了一种基于位点特异性重组酶介导的盒式交换的构巢曲霉中大型生物合成基因簇的靶向染色体整合系统。我们构建了含有 Cre/ lox染色体着陆区的构巢曲霉菌株-介导的重组，并证明了一个 21 kb DNA 片段在一个步骤中的有效靶向整合。我们通过分析荧光报告基因的表达和异源聚酮化合物代谢物的产生进一步评估了两个基因座的整合。我们将这些着陆位点的染色体表达与基于 AMA1 的附加型表达进行了比较，这也揭示了丝状真菌中附加型表达的未表征方面。这是在丝状真菌中首次展示位点特异性重组酶介导的整合，为进一步开发该工具奠定了基础。
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更新日期：2022-02-16
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