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一种 UDP-糖基转移酶工程在大肠杆菌中高效全细胞生物合成 Siamenoside I
Journal of Agricultural and Food Chemistry ( IF 5.7 ) Pub Date : 2022-01-31 , DOI: 10.1021/acs.jafc.1c07699
Yuncong Xu 1 , Shiqiang Liu 1 , Liuyun Bian 1 , Zhenlin Li 2 , Chen Luo 1 , Yijun Chen 3 , Xuri Wu 1
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迄今为止,从罗汉果中分离出的最甜的糖苷 siamenoside I (SI) 的可用性不足和结构复杂,限制了其作为天然甜味剂的用途。为了解决这个问题,一种改进的生物催化剂 UGT-M2 是通过从罗汉果中改造尿苷二磷酸糖基转移酶 UGT94-289-2将罗汉果苷 IIIE (MG IIIE)单糖基化为 SI 来半合理地创建的。随后,经过改造的大肠杆菌构建了细胞,将 UGT-M2 与 UDP-葡萄糖再生系统相结合,以避免需要昂贵的 UDP-葡萄糖来产生 SI。优化后,在不使用外源 UDP-葡萄糖的情况下,以 1 L 规模从 MG IIIE 高效制备高纯度 SI(>96.4%),产率为 29.78 g/(L·天),摩尔产率为 76.5%。该研究不仅开发了一种全细胞制备 SI 的方法,而且为未来合成生物学的 SI 生物合成提供了一种替代的糖基转移酶变体。



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更新日期:2022-02-09
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