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双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)类似物:吡咯烷基核苷三磷酸(prNTPs)的合成和聚合酶底物活性
Bioorganic & Medicinal Chemistry ( IF 3.3 ) Pub Date : 2016-08-30 14:28:12
Chandrasekhar Reddy Gade, Manjusha Dixit, Nagendra K. Sharma

双脱氧核苷三磷酸(ddNTPs)终止了DNA的生物聚合,并成为DNA测序技术的重要化学成分,而DNA测序技术现已成为分子生物学研究的基本工具。在这种方法中,通过在PCR条件下将单个标记的ddNTP掺入DNA后,通过检测终止的DNA片段,将放射性标记或荧光染料标记的ddNTP类似物用于DNA测序。本报告介绍了通过LC-MS和凝胶电泳技术合理设计的新型氨基功能化ddNTP类似物(如吡咯烷核苷三磷酸(prNTPs))的合成及其与DNA聚合酶的聚合酶活性。质量和PAGE分析强烈支持使用Therminator DNA聚合酶将prNTPs掺入DNA寡核苷酸中,就像控制底物ddNTP一样。结果,通过与聚合酶结合的prNTP将DNA寡核苷酸官能化为胺基。因此,prNTPs提供了在不修饰核碱基结构的情况下与其他生物分子/染料/荧光分子制备所需的共轭DNA的机会。



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更新日期:2016-08-31
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