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Box-Behnken优化麦麸酶解糖化实验设计
Biomass Conversion and Biorefinery ( IF 3.5 ) Pub Date : 2021-03-02 , DOI: 10.1007/s13399-021-01378-0 Tatielle Pereira Silva , Alexsandra Nascimento Ferreira , Fabiana Sarmento de Albuquerque , Andréa Carla de Almeida Barros , José Maria Rodrigues da Luz , Francis Soares Gomes , Hugo Juarez Vieira Pereira
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更新日期:2021-03-02
Biomass Conversion and Biorefinery ( IF 3.5 ) Pub Date : 2021-03-02 , DOI: 10.1007/s13399-021-01378-0 Tatielle Pereira Silva , Alexsandra Nascimento Ferreira , Fabiana Sarmento de Albuquerque , Andréa Carla de Almeida Barros , José Maria Rodrigues da Luz , Francis Soares Gomes , Hugo Juarez Vieira Pereira
木质纤维素原料已被广泛研究以获得生物产品。去木质素的预处理,原料组成的不确定性,较长的水解时间以及大量昂贵的酶是限制可发酵糖生产的因素。统计优化可以帮助调整这些限制因素和酶促糖化变量。这项研究旨在优化使用麦麸Botrytis ricini生产可发酵糖的条件URM 5627内切葡聚糖酶和Box–Behnken实验设计(一种响应面方法)。水解后,用刚果红对聚丙烯酰胺凝胶中的酶谱测定法进行染色。酶活性测量表明,酶在不同温度(− 20°C和6°C)和周期(长达120天)下具有稳定性。在酶促糖化之前和之后,使用傅立叶变换红外光谱(FTIR)对麦麸进行表征。使用Box–Behnken设计优化了糖化时间,底物负载和酶负载。酶谱图显示了约39 kDa的单个活性带,即B. ricini的分子量。URM5627内切葡聚糖酶。分别在− 20°C和6°C下储存120天后,酶的活性分别保持在78.78%和86.08%。FTIR分析显示酶作用后纤维素脱木素和松动。当条件保持在计划的中心位置(8小时,2%的底物负载和4%的酶负载)时,还原糖产量最高(116.93 mg g -1)。从蓖麻双歧杆菌中分离出的酶在固体培养基和贮存形式中都是稳定的,并且可以不经预处理将麦麸糖化。还原糖的高产量以及预测值与实际值之间的接近证明了统计优化在木质纤维素生物质糖化中的有效性。
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