Ecotoxicology and Environmental Safety ( IF 6.2 ) Pub Date : 2021-01-08 , DOI: 10.1016/j.ecoenv.2020.111857 Yipeng Sun , Zhaowen Shi , Yuhua Lin , Mengzhe Zhang , Jinjin Liu , Linyun Zhu , Qingge Chen , Junjie Bi , Shanqun Li , Zhenhua Ni , Xiongbiao Wang
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目标
苯并（a）re（BaP）是一种普遍存在的空气污染物，BaP暴露会导致呼吸系统疾病。气道粘液分泌过多和粘蛋白5AC（MUC5AC）的高表达与空气污染引起的常见呼吸系统疾病有关。我们旨在研究BaP对MUC5AC表达的影响，特别是BaP诱导MUC5AC基因表达的机制。
方法
使用人气道上皮细胞NCI-H292在体外测试BaP对MUC5AC表达的影响。通过实时定量PCR，免疫化学和蛋白质印迹评估MUC5AC mRNA和蛋白表达。进行荧光素酶测定以检测启动子的活性。用相应的探针测量细胞的总ROS和线粒体ROS。小干扰RNA被用于基因沉默。通过用AhR过表达慢病毒转染来构建AhR过表达细胞系。
结果
我们发现BaP刺激上调了MUC5AC mRNA和蛋白水平并激活了ERK通路。用U0126（一种ERK抑制剂）抑制ERK或用siRNA抑制ERK可降低BaP诱导的MUC5AC表达。BaP处理后，用MUC5AC启动子和cAMP反应元件（CRE）转染的萤光素酶活性增加，而CREB siRNA抑制BaP诱导的MUC5AC过表达。此外，BaP增加了线粒体ROS的产生，而线粒体ROS抑制剂Mito-TEMP抑制了BaP诱导的MUC5AC表达和ERK活化。BaP增加CYP1A1和CYP1B1的mRNA水平，而CYP1s抑制剂Alizarin抑制BaP的作用，包括MUC5AC过表达，ERK激活和线粒体ROS生成。BaP诱导芳基烃受体（AhR）从细胞质向细胞核移位。siRNA介导的敲除或化学抑制AhR降低了BaP诱导的MUC5AC的表达，而AhR的过表达显着增强了BaP诱导的MUC5AC的表达。内源性AhR配体ITE也上调了MUC5AC的mRNA和蛋白表达。此外，白藜芦醇治疗抑制了BaP诱导的MUC5AC过表达，AhR易位，线粒体ROS产生和ERK途径活化。也上调了MUC5AC的mRNA和蛋白表达。此外，白藜芦醇治疗抑制了BaP诱导的MUC5AC过表达，AhR易位，线粒体ROS产生和ERK途径活化。也上调了MUC5AC的mRNA和蛋白表达。此外，白藜芦醇治疗抑制了BaP诱导的MUC5AC过表达，AhR易位，线粒体ROS产生和ERK途径活化。
结论
在这里，我们强调了AhR /线粒体ROS / ERK途径激活在BaP诱导的MUC5AC过表达中的关键作用，并确认白藜芦醇是减少BaP诱导的MUC5AC过表达的有前途的药物。
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