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铜绿假单胞菌 细菌群体感应机制中LasR蛋白的表征
Biotechnology and Bioprocess Engineering ( IF 2.5 ) Pub Date : 2009-05-17 , DOI: 10.1007/s12257-008-0188-z
Hai Bo Liu , Kyong Pyo Koh , Joon Hee Lee , Jung Sun Kim , Sunghoon Park

铜绿假单胞菌 的群体感应(QS)机制 由于涉及囊性纤维化而被广泛研究,囊性纤维化是一种致命的疾病,每年导致一千多人死亡。为了开发筛选QS抑制剂的生化分析方法,我们研究了重组LasR蛋白的生产和表征,该蛋白是 铜绿假单胞菌 QS机制的转录激活因子 。在重组 大肠杆菌中 当仅在适当的信号分子(酰基高丝氨酸内酯,AHL)存在下培养细胞时,BL21,LasR被生产为功能活性蛋白。可以从在AHL缺陷培养基中生长的细胞中获得一些可溶性LasR蛋白,但它们对启动子序列OP1( lasB 弹性蛋白酶启动子)没有结合亲和力 。此外,活性LasR可能以LasR-AHL复合物的形式产生, 在体外 并未解离成其组分(LasR和AHLs) 。目前的结果表明,缺乏AHL的纯活性LasR的生产非常困难。可以得出结论,除非修饰LasR的结构和/或其折叠过程,否则可能无法开发用于筛选需要纯净和活性LasR蛋白的AHL竞争性抑制剂的生化分析方法。



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更新日期:2009-05-17
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