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MAPK途径和SIRT1参与金雀异黄素在转移性癌细胞中对骨桥蛋白分泌的下调
Life Sciences ( IF 5.2 ) Pub Date : 2020-11-26 , DOI: 10.1016/j.lfs.2020.118787
Kitboklang Khongsti , Kuheli Biswas Das , Bidyadhar Das

目标

确定了染料木黄酮对转移性癌细胞(MDA-MB-435和MDA-MB-231)中分泌的骨桥蛋白(OPN)表达的调节及其功能后遗症。

主要方法

Western blot和实时荧光定量PCR分别用于分析蛋白质和mRNA转录本。通过染色质免疫沉淀测定,生物信息学分析,转染和萤光素酶报告基因测定来分析分泌的OPN可能的转录调控。特定的siRNA和组成型p-ERK用于评估MAPK途径的作用。通过细胞集落形成,迁移和侵袭试验分析了染料木黄酮在这些细胞中的功能性后遗症。

主要发现

金雀异黄素在这些细胞中抑制了分泌的OPN表达(最多约0.7倍)。Genistein(50μM)在集落形成速率,迁移和侵袭方面显示出这些细胞的侵略性降低。在24 h进行50μM金雀异黄素和15μM白藜芦醇处理后,p-ERK½分别增加了约2.5倍和约1.5倍。抑制ERK½和MEK抑制剂PD98059可以促进这些细胞在体外分泌OPN的表达。而组成型活性ERK2(L73P和S151D)的转染降低了分泌的OPN表达。此外,在染料木黄酮处理(50μM)后,同样用白藜芦醇(约1.5倍)(SIRT1的激活剂),细胞中的沉默交配型信息调节2同源物1(SIRT1)表达也增加了(约1.6倍)。

意义

MAPK途径和SIRT1激活参与了染料木黄酮对这些细胞分泌的OPN的调节。





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更新日期:2020-12-01
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