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CRISPR-Cas13d在动物胚胎中诱导有效的mRNA敲低。
Developmental Cell ( IF 10.7 ) Pub Date : 2020-08-07 , DOI: 10.1016/j.devcel.2020.07.013
Gopal Kushawah 1 , Luis Hernandez-Huertas 2 , Joaquin Abugattas-Nuñez Del Prado 3 , Juan R Martinez-Morales 4 , Michelle L DeVore 1 , Huzaifa Hassan 1 , Ismael Moreno-Sanchez 2 , Laura Tomas-Gallardo 5 , Alejandro Diaz-Moscoso 5 , Dahiana E Monges 2 , Javier R Guelfo 2 , William C Theune 6 , Emry O Brannan 6 , Wei Wang 1 , Timothy J Corbin 1 , Andrea M Moran 1 , Alejandro Sánchez Alvarado 7 , Edward Málaga-Trillo 8 , Carter M Takacs 6 , Ariel A Bazzini 9 , Miguel A Moreno-Mateos 2
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早期胚胎发育完全由沉积在卵母细胞中的母体基因产物驱动。尽管在建立早期发育计划中至关重要,但由于缺乏系统的干扰和评估技术,孕产妇的基因功能仍然难以捉摸。CRISPR-Cas13系统最近已被用于降解酵母,植物和哺乳动物细胞系中的RNA。但是,尚未在动物系统中对Cas13的潜力进行系统的研究。在这里,我们证明了CRISPR-RfxCas13d(CasRx)是一种有效且精确的系统,可以消除斑马鱼胚胎中特定的mRNA转录物。我们证明,合子表达和母本提供的成绩单是有效的针对性,导致成绩单水平平均下降76%和知名胚胎表型的概括。此外,我们证明了该系统可用于青aka,致死鱼和小鼠胚胎。总之,我们的结果表明,CRISPR-RfxCas13d是一个有效的敲低平台,可在动物胚胎中检验基因功能。





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更新日期:2020-09-28
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