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2-氨基苯甲酸在MALDI靶上进行N-聚糖非还原胺化。
Analytical Chemistry ( IF 6.7 ) Pub Date : 2020-07-06 , DOI: 10.1021/acs.analchem.0c01748 Xiaoping L Hronowski , Yan Wang , Zoran Sosic , Ru Wei
Analytical Chemistry ( IF 6.7 ) Pub Date : 2020-07-06 , DOI: 10.1021/acs.analchem.0c01748 Xiaoping L Hronowski , Yan Wang , Zoran Sosic , Ru Wei
2-氨基苯甲酸(2-AA)被广泛用作标记试剂,通过还原胺化作用使释放的N-聚糖在其自由还原端衍生化。2-AA标记的聚糖对它们的鉴定具有更高的质谱灵敏度,并使基于荧光色谱的聚糖定量成为可能。缺点是贴标过程需要大量劳力和时间。通过去除过量的标记试剂来清除标记的聚糖通常会导致样品流失。在这里,我们报告使用2-AA通过非还原胺化在MALDI目标上标记N-聚糖,同时在MALDI-MS聚糖分析中用作基质。与使用传统的2,5-二羟基苯甲酸(2,5-DHB)基质相比,将2-AA偶联到聚糖上可显着增加聚糖阴离子信号。MALDI上的目标样品制备是具有高衍生化效率的单步操作方案。还应注意的是,2-AA标记的聚糖生成的去质子化分子阴离子占主导地位,而钠加合物的数量少得多且强度低,因此大大简化了聚糖谱。我们进一步探索了其在生物治疗性单克隆抗体的N-聚糖谱中的应用,并能够在低微克糖蛋白水平上实现灵敏的聚糖鉴定。这种2-AA对MALDI的目标聚糖衍生化消除了繁琐的样品制备过程,并避免了样品流失。它通常适用于其他应用程序(例如糖组学),其中有限量的糖蛋白可用于分析。还应注意的是,2-AA标记的聚糖生成的去质子化分子阴离子占主导地位,而钠加合物的数量少得多且强度低,因此大大简化了聚糖谱。我们进一步探索了其在生物治疗性单克隆抗体的N-聚糖谱中的应用,并能够在低微克糖蛋白水平上实现灵敏的聚糖鉴定。这种2-AA对MALDI的目标聚糖衍生化消除了繁琐的样品制备过程,并避免了样品流失。它通常适用于其他应用程序(例如糖组学),其中有限量的糖蛋白可用于分析。还应注意的是,2-AA标记的聚糖生成的去质子化分子阴离子占主导地位,而钠加合物的数量少得多且强度低,因此大大简化了聚糖谱。我们进一步探索了其在生物治疗性单克隆抗体的N-聚糖谱中的应用,并能够在低微克糖蛋白水平上实现灵敏的聚糖鉴定。这种2-AA对MALDI的目标聚糖衍生化消除了繁琐的样品制备过程,并避免了样品流失。它通常适用于其他应用程序(例如糖组学),其中有限量的糖蛋白可用于分析。我们进一步探索了其在生物治疗性单克隆抗体的N-聚糖谱中的应用,并能够在低微克糖蛋白水平上实现灵敏的聚糖鉴定。这种2-AA对MALDI的目标聚糖衍生化消除了繁琐的样品制备过程,并避免了样品流失。它通常适用于其他应用程序(例如糖组学),其中有限量的糖蛋白可用于分析。我们进一步探索了其在生物治疗性单克隆抗体的N-聚糖谱中的应用,并能够在低微克糖蛋白水平上实现灵敏的聚糖鉴定。这种2-AA对MALDI的目标聚糖衍生化消除了繁琐的样品制备过程,并避免了样品流失。它通常适用于其他应用程序(例如糖组学),其中有限量的糖蛋白可用于分析。
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更新日期:2020-08-04
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