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二氢驱动的NADPH循环在工程耐受O2的加氢酶介导的亚胺还原和P450催化的氧化中
ChemCatChem ( IF 3.8 ) Pub Date : 2020-06-16 , DOI: 10.1002/cctc.202000763 Janina Preissler 1 , Holly A. Reeve 2 , Tianze Zhu 2 , Jake Nicholson 2 , Kouji Urata 2 , Lars Lauterbach 1 , Luet L. Wong 2 , Kylie A. Vincent 2 , Oliver Lenz 1
ChemCatChem ( IF 3.8 ) Pub Date : 2020-06-16 , DOI: 10.1002/cctc.202000763 Janina Preissler 1 , Holly A. Reeve 2 , Tianze Zhu 2 , Jake Nicholson 2 , Kouji Urata 2 , Lars Lauterbach 1 , Luet L. Wong 2 , Kylie A. Vincent 2 , Oliver Lenz 1
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Ralstonia eutropha(Cupriavidus necator)的耐O 2的NAD +还原氢酶(SH)已在体内和体外用于H 2驱动的NADH循环中,与各种NADH依赖的氧化还原酶进行了偶联酶反应。为了扩大在NADPH依赖性生物催化中的应用范围,我们通过合理诱变引入了酶的NAD +结合口袋的变化,并产生了对NADP +的亲和力明显高于对自然底物NAD +的变异体,同时保留了天然O 2-公差。SH变体在H 2驱动的NADPH供应中的适用性通过立体选择性亚胺还原酶催化将2-甲基-1-吡咯啉完全转化为2-甲基吡咯烷的单一对映体。在一个更具挑战性的反应中,SH支持细胞色素P450单加氧酶在安全的H 2 / O 2混合物下氧化辛烷。因此,重新设计的SH代表了一个多功能平台,可在涉及NADPH依赖的氧化还原酶的生物转化中实现原子效率高,H 2驱动的辅因子循环。
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更新日期:2020-06-16
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