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小分子调节的 sgRNA 能够通过 Cas9 控制大肠杆菌中的基因组编辑。
Nature Communications ( IF 14.7 ) Pub Date : 2020-03-13 , DOI: 10.1038/s41467-020-15226-8 Roman S Iwasaki 1 , Bagdeser A Ozdilek 1, 2 , Andrew D Garst 3, 4 , Alaksh Choudhury 3, 5 , Robert T Batey 1
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CRISPR-Cas9 为基因编辑的广泛应用带来了巨大进步。为了进一步利用 Cas9，人们一直在努力实现对其核酸酶活性的时间控制。虽然不同的方法都侧重于调节哺乳动物细胞中的 CRISPR 干扰或编辑，但所报道的方法都无法控制细菌中的核酸酶活性。在这里，我们开发了 RNA 连接体，将茶碱和 3-甲基黄嘌呤 (3MX) 结合适体与 sgRNA 结合起来，从而在大肠杆菌中实现小分子依赖性编辑。这些可激活的引导RNA能够实现体内基因编辑的时间和转录后控制。此外，它们还减少了由基因组切割引起的宿主细胞死亡，这是 CRISPR 介导的细菌重组工程的一个主要限制。
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