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Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas9-Mediated Lateral Flow Nucleic Acid Assay.
ACS Nano ( IF 15.8 ) Pub Date : 2020-02-14 , DOI: 10.1021/acsnano.0c00022 Xusheng Wang 1 , Erhu Xiong 1 , Tian Tian 1 , Meng Cheng 1 , Wei Lin 1 , Heng Wang 2, 3 , Guihong Zhang 2, 3, 4 , Jian Sun 2, 3, 4 , Xiaoming Zhou 1
ACS Nano ( IF 15.8 ) Pub Date : 2020-02-14 , DOI: 10.1021/acsnano.0c00022 Xusheng Wang 1 , Erhu Xiong 1 , Tian Tian 1 , Meng Cheng 1 , Wei Lin 1 , Heng Wang 2, 3 , Guihong Zhang 2, 3, 4 , Jian Sun 2, 3, 4 , Xiaoming Zhou 1
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The lateral flow assay is one of the most convenient analytical techniques for analyzing the immune response, but its applicability to precise genetic analyses is limited by the false-positive signal and tedious and inefficient hybridization steps. Here, we introduce the CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats) /Cas system into the lateral flow assay, termed CRISPR/Cas9-mediated lateral flow nucleic acid assay (CASLFA), to address such issues. In this study, CASLFA is utilized to identify Listeria monocytogenes, genetically modified organisms (GMOs), and African swine fever virus (ASFV) at a detection limit of hundreds of copies of genome samples with high specificity within 1 h. We further evaluated the performance of CASLFA in a nonlaboratory environment and successfully confirmed 27 ASFV-infected samples from 110 suspected swine serum samples, with an accuracy of 100% when compared to real-time PCR (RT-PCR) assay. CASLFA satisfies some of the characteristics of a next-generation molecular diagnostics tool due to its rapidity and accuracy, allowing for point-of-care use without the need for technical expertise and complex ancillary equipment. This method has great potential for gene analysis in resource-poor or nonlaboratory environments.
中文翻译：
聚簇规则间隔的短回文重复/ Cas9介导的侧向流动核酸测定。
侧向流动测定法是分析免疫反应的最方便的分析技术之一，但是其对精确遗传分析的适用性受到假阳性信号以及繁琐且效率低下的杂交步骤的限制。在这里，我们将CRISPR（聚类的规则间隔的短回文重复序列）/ Cas系统引入侧向流动测定中，称为CRISPR / Cas9介导的侧向流动核酸测定（CASLFA），以解决此类问题。在这项研究中，CASLFA用于鉴定单核细胞增生李斯特菌，转基因生物（GMO）和非洲猪瘟病毒（ASFV），检测限为1小时内数百份具有高特异性的基因组样本。我们进一步评估了CASLFA在非实验室环境中的性能，并成功地从110个可疑猪血清样本中确认了27个被ASFV感染的样本，与实时PCR（RT-PCR）分析相比，其准确性为100％。CASLFA的快速性和准确性满足了下一代分子诊断工具的某些特征，因此无需技术专业知识和复杂的辅助设备即可在医疗现场使用。该方法在资源匮乏或非实验室环境中具有巨大的基因分析潜力。无需技术专业知识和复杂的辅助设备即可进行即时医疗服务。该方法在资源匮乏或非实验室环境中具有巨大的基因分析潜力。无需技术专业知识和复杂的辅助设备即可进行即时医疗服务。该方法在资源匮乏或非实验室环境中具有巨大的基因分析潜力。
更新日期：2020-02-17
中文翻译：
聚簇规则间隔的短回文重复/ Cas9介导的侧向流动核酸测定。
侧向流动测定法是分析免疫反应的最方便的分析技术之一，但是其对精确遗传分析的适用性受到假阳性信号以及繁琐且效率低下的杂交步骤的限制。在这里，我们将CRISPR（聚类的规则间隔的短回文重复序列）/ Cas系统引入侧向流动测定中，称为CRISPR / Cas9介导的侧向流动核酸测定（CASLFA），以解决此类问题。在这项研究中，CASLFA用于鉴定单核细胞增生李斯特菌，转基因生物（GMO）和非洲猪瘟病毒（ASFV），检测限为1小时内数百份具有高特异性的基因组样本。我们进一步评估了CASLFA在非实验室环境中的性能，并成功地从110个可疑猪血清样本中确认了27个被ASFV感染的样本，与实时PCR（RT-PCR）分析相比，其准确性为100％。CASLFA的快速性和准确性满足了下一代分子诊断工具的某些特征，因此无需技术专业知识和复杂的辅助设备即可在医疗现场使用。该方法在资源匮乏或非实验室环境中具有巨大的基因分析潜力。无需技术专业知识和复杂的辅助设备即可进行即时医疗服务。该方法在资源匮乏或非实验室环境中具有巨大的基因分析潜力。无需技术专业知识和复杂的辅助设备即可进行即时医疗服务。该方法在资源匮乏或非实验室环境中具有巨大的基因分析潜力。
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