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基于表达GFP的重组VSV建立安全,快速,方便,低成本的干扰素生物活性抗病毒测定方法。
Journal of Virological Methods ( IF 2.2 ) Pub Date : 2017-08-24 , DOI: 10.1016/j.jviromet.2017.08.007
Weiye Chen 1 , Zhiyuan Wen 1 , Jialin Zhang 1 , Cuicui Li 1 , Kehe Huang 2 , Zhigao Bu 1
Journal of Virological Methods ( IF 2.2 ) Pub Date : 2017-08-24 , DOI: 10.1016/j.jviromet.2017.08.007
Weiye Chen 1 , Zhiyuan Wen 1 , Jialin Zhang 1 , Cuicui Li 1 , Kehe Huang 2 , Zhigao Bu 1
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干扰素(I,II或III型)抗病毒活性的定量测定方法在进行研究期间非常重要,因为它们已经被发现。在这里,使用表达绿色荧光蛋白(GFP)(VSV / GFP)和MDBK细胞的重组水泡性口炎病毒来开发针对IFN的抗病毒测定(AVA)。该方法在96孔细胞培养板上进行,通过检测GFP量化了病毒复制的一半减少。为了定量GFP,将细胞裂解缓冲液直接添加到用VSV / GFP感染的孔中裂解细胞,然后使VSV / GFP失活,并测量GFP的相对荧光单位(RFU)并用于计算抗病毒活性。该方法仅需一个步骤,而无需用萘酚蓝黑染色方法中的三个步骤,可以使用酚红培养基,重现性好。可以将含GFP的样品在4°C的湿箱中保存至少1周,而不会影响测定结果。另外,用这种方法获得的结果与用染色方法获得的结果相似。总之,建立了基于重组VSV / GFP的IFN的安全,快速,方便和低成本的AVA。
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更新日期:2019-11-01

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