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钙黄绿素-AM 方法是检测整个细胞“不稳定铁库”还是仅检测其中的一小部分?
Biochemical Journal ( IF 4.4 ) Pub Date : 2007-04-15 , DOI: 10.1042/bj20061840 Margarita Tenopoulou 1 , Tino Kurz , Paschalis-Thomas Doulias , Dimitrios Galaris , Ulf T Brunk
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钙黄绿素-AM(钙黄绿素-乙酰氧基甲酯)方法是一种广泛使用的技术,用于测定细胞内“不稳定铁池”(LIP)。当培养的细胞接触到这种酯时,它会穿过质膜并与胞质非特异性酯酶发生反应。反应产物之一钙黄绿素是一种荧光染料和一种亲水性醇,其膜不可渗透,因此保留在细胞的胞浆内。钙黄绿素荧光在低质量不稳定铁螯合后被猝灭,猝灭程度可以估计可螯合铁的量。然而,该测定能够总体证明细胞 LIP 的要求是,此类铁位于细胞质中,而不是位于膜限制的隔室中。一段时间以来,人们已经知道,由于含铁物质(例如线粒体复合物和铁蛋白)的自噬降解,细胞中具有氧化还原活性的不稳定低质量铁的主要部分暂时位于溶酶体区室中。即使一些钙黄绿素-AM可能逃脱胞质酯酶并进入溶酶体被溶酶体酸性酯酶裂解,所得的钙黄绿素也不会显着螯合铁
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