不同 DHB 异构体作为基质对磷脂的 MALDI-TOF MS 分析的适用性：哪种异构体用于什么目的？,European Biophysics Journal

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不同 DHB 异构体作为基质对磷脂的 MALDI-TOF MS 分析的适用性：哪种异构体用于什么目的？
European Biophysics Journal ( IF 2.2 ) Pub Date : 2006-09-20 , DOI: 10.1007/s00249-006-0090-6
Jürgen Schiller ₁ , Rosmarie Süss , Beate Fuchs , Matthias Müller , Marijana Petković , Olaf Zschörnig , Hanka Waschipky

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虽然大生物分子的分析是基质辅助激光解吸和电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) 的主要应用，但脂质分析的兴趣也在增加。由于脂质具有相对较小的分子量，基质信号应尽可能小，以避免与脂质峰重叠。尽管 2,5-二羟基苯甲酸 (DHB) 是一种成熟的 MALDI 基质，但这种异构体是否适合脂质分析的问题尚未得到解决。测定了所有六种 DHB 异构体的紫外吸收并记录了它们的激光解吸光谱。此外，所有异构体都被用作基质来记录所选磷脂（磷脂酰胆碱和-丝氨酸）的正离子和负离子质谱：按 2,5-、2,6-、2,3- 和 2,4-DHB 的顺序, 正离子脂质光谱的质量下降。这与应用的 DHB 异构体的酸度降低密切相关。3,4- 和 3,5- 异构体仅给出非常微弱的正离子信号，尤其是酸性脂质。相比之下，负离子模式下最合适的基质是 2,5-、2,4- 和 3,5-DHB。由于其明显的酸性，2,6-DHB 在负离子模式下不提供任何信号。最后，还通过原子力显微镜 (AFM) 监测纯基质和基质/脂质共晶的结晶行为的差异：2,5-DHB 产生最小的晶体和最薄的层。得出的结论是，基本上所有 DHB 异构体都可以用作 MALDI 基质，但 2,5-异构体代表了最通用的化合物。3,4- 和 3,5- 异构体仅给出非常微弱的正离子信号，尤其是酸性脂质。相比之下，负离子模式下最合适的基质是 2,5-、2,4- 和 3,5-DHB。由于其明显的酸性，2,6-DHB 在负离子模式下不提供任何信号。最后，还通过原子力显微镜 (AFM) 监测纯基质和基质/脂质共晶的结晶行为的差异：2,5-DHB 产生最小的晶体和最薄的层。得出的结论是，基本上所有 DHB 异构体都可以用作 MALDI 基质，但 2,5-异构体代表了最通用的化合物。3,4- 和 3,5- 异构体仅给出非常微弱的正离子信号，尤其是酸性脂质。相比之下，负离子模式下最合适的基质是 2,5-、2,4- 和 3,5-DHB。由于其明显的酸性，2,6-DHB 在负离子模式下不提供任何信号。最后，还通过原子力显微镜 (AFM) 监测纯基质和基质/脂质共晶的结晶行为的差异：2,5-DHB 产生最小的晶体和最薄的层。得出的结论是，基本上所有 DHB 异构体都可以用作 MALDI 基质，但 2,5-异构体代表了最通用的化合物。由于其明显的酸度，6-DHB 在负离子模式下不提供任何信号。最后，还通过原子力显微镜 (AFM) 监测纯基质和基质/脂质共晶的结晶行为的差异：2,5-DHB 产生最小的晶体和最薄的层。得出的结论是，基本上所有 DHB 异构体都可以用作 MALDI 基质，但 2,5-异构体代表了最通用的化合物。由于其明显的酸度，6-DHB 在负离子模式下不提供任何信号。最后，还通过原子力显微镜 (AFM) 监测纯基质和基质/脂质共晶的结晶行为的差异：2,5-DHB 产生最小的晶体和最薄的层。得出的结论是，基本上所有 DHB 异构体都可以用作 MALDI 基质，但 2,5-异构体代表了最通用的化合物。

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The suitability of different DHB isomers as matrices for the MALDI-TOF MS analysis of phospholipids: which isomer for what purpose?

Although the analysis of large biomolecules is the prime application of matrix-assisted laser desorption and ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS), there is also increasing interest in lipid analysis. Since lipids possess relatively small molecular weights, matrix signals should be as small as possible to avoid overlap with lipid peaks. Although 2,5-dihydroxybenzoic acid (DHB) is an established MALDI matrix, the question whether just this isomer is ideal for lipid analysis was not yet addressed. UV absorptions of all six DHB isomers were determined and their laser desorption spectra recorded. In addition, all isomers were used as matrices to record positive and negative ion mass spectra of selected phospholipids (phosphatidylcholine and -serine): In the order 2,5-, 2,6-, 2,3- and 2,4-DHB, the quality of the positive ion lipid spectra decreases. This correlates well with the decreasing acidity of the applied DHB isomers. The 3,4- and 3,5- isomers give only very weak positive ion signals especially of acidic lipids. In contrast, the most suitable matrices in the negative ion mode are 2,5-, 2,4- and 3,5-DHB. 2,6-DHB does not provide any signal in the negative ion mode due to its marked acidity. Finally, differences in the crystallization behavior of the pure matrix and the matrix/lipid co-crystals were also monitored by atomic force microscopy (AFM): 2,5-DHB gave the smallest crystals and the skinniest layer. It is concluded that basically all DHB isomers can be used as MALDI matrices but the 2,5-isomer represents the most versatile compound.

更新日期：2019-11-01

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