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三种Bcl-2家族蛋白的表达,纯化及活性分析
Sheng wu yi xue gong cheng xue za zhi = Journal of biomedical engineering = Shengwu yixue gongchengxue zazhi Pub Date : 2010-09-17
Cuixia Zhu 1 , Xun Li , Wenwen Li , Zhimin Shi , Jiahai Zhou , Renxiao Wang
Sheng wu yi xue gong cheng xue za zhi = Journal of biomedical engineering = Shengwu yixue gongchengxue zazhi Pub Date : 2010-09-17
Cuixia Zhu 1 , Xun Li , Wenwen Li , Zhimin Shi , Jiahai Zhou , Renxiao Wang
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Bcel-2家族蛋白(Bcl-x(L),Bcl-2,Mel-1等)是某些生命过程(包括凋亡和自噬)的关键调节因子。目前,它们被认为是开发新的抗肿瘤疗法的有希望的靶标。在我们的研究中,设计并克隆了人Bcl-2 / Bcl-x(L)嵌合基因和人/小鼠Mel-1嵌合基因,并表达了谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白的原核表达载体和分别构建了组氨酸标签融合蛋白。这两种蛋白以及GST-Bcl-x(L)融合蛋白均已在大肠杆菌中成功表达并随后纯化。另外,我们通过基于荧光偏振的测定法测量了这些Bcl-2家族蛋白与Bid BH3肽的结合。我们获得的解离常数(Kd)与文献报道的数据基本一致。具有或不具有GST标签的所有三种蛋白质的Kd值几乎相同。所有这些结果证实了我们获得的这些Bcl-2家族蛋白的生物学功能。这些蛋白可用于体外筛选Bcl-2家族蛋白的小分子调节剂。
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更新日期:2019-11-01

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