BACKGROUND Broussonetia papyrifera (B. papyrifera), also known as paper mulberry, has been used as a traditional medicine for the treatment of several diseases, including ophthalmic disorders and impotency. However, the biological activity of kazinol A (1) among flavonols isolated from B. papyrifera has not been identified. PURPOSE We identified a candidate metabolite for anti-human bladder cancer treatment from B. papyrifera and investigated the possible molecular mechanisms underlying its cytotoxic effects in T24 and cisplatin-resistant T24R2 human bladder cancer cells. METHODS T24 and T24R2 cells were treated with five flavonols from B. papyrifera and their cytotoxic effects were determined using MTT assay, cell cycle analysis, mitochondrial membrane potential, and propidium iodide staining. Autophagy rate was calculated by counting LC3-GFP dots in the cells. All related protein expressions were analyzed by immunoblotting. RESULTS Compound 1 showed relatively higher cytotoxicity in the human bladder cancer cells, T24 and T24R2, rather than other tissues-originated cancer cells. Compound 1 significantly attenuated cell growth through G0/1 arrest mediated by a decrease in cyclin D1 and an increase of p21. Apoptosis and autophagy induced by compound 1 treatment was accompanied by a modulation of the AKT-BAD pathway and AMPK-mTOR pathway, respectively. CONCLUSIONS Our results suggest that compound 1 induces cytotoxic effects in human bladder cancer cells, including the cisplatin-resistant T24R2. Compound 1 may be a candidate for the development of effective anti-cancer drug on human urinary bladder cancer.

中文翻译：

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纸莎草芽孢杆菌Kazinol A对人膀胱癌细胞T24和T24R2的细胞毒性作用。

背景技术Brossonetia papyrifera（B. papyrifera），也被称为桑，已经被用作治疗包括眼科疾病和阳ot的几种疾病的传统药物。然而，尚未鉴定出从枯草芽孢杆菌分离出的黄酮醇中卡扎醇A（1）的生物活性。目的我们从纸芽孢杆菌中鉴定了一种可用于抗人膀胱癌治疗的候选代谢物，并研究了其在T24和顺铂耐药性T24R2人膀胱癌细胞中的细胞毒性作用的可能分子机制。方法用5株乳杆菌中的黄酮醇处理T24和T24R2细胞，用MTT法，细胞周期分析，线粒体膜电位和碘化丙锭染色法测定其细胞毒性作用。通过计数细胞中的LC3-GFP点来计算自噬速率。通过免疫印迹分析所有相关蛋白表达。结果化合物1在人膀胱癌细胞T24和T24R2中显示出相对更高的细胞毒性，而不是其他组织起源的癌细胞。化合物1通过细胞周期蛋白D1的减少和p21的增加介导的G0 / 1停滞显着减弱了细胞的生长。由化合物1处理诱导的细胞凋亡和自噬分别伴随着AKT-BAD途径和AMPK-mTOR途径的调节。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。通过免疫印迹分析所有相关蛋白表达。结果化合物1在人膀胱癌细胞T24和T24R2中显示出相对更高的细胞毒性，而不是其他组织起源的癌细胞。化合物1通过细胞周期蛋白D1的减少和p21的增加介导的G0 / 1停滞显着减弱了细胞的生长。由化合物1处理诱导的细胞凋亡和自噬分别伴随着AKT-BAD途径和AMPK-mTOR途径的调节。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。通过免疫印迹分析所有相关蛋白表达。结果化合物1在人膀胱癌细胞T24和T24R2中显示出相对更高的细胞毒性，而不是其他组织起源的癌细胞。化合物1通过细胞周期蛋白D1的减少和p21的增加介导的G0 / 1停滞显着减弱了细胞的生长。由化合物1处理诱导的细胞凋亡和自噬分别伴随着AKT-BAD途径和AMPK-mTOR途径的调节。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。结果化合物1在人膀胱癌细胞T24和T24R2中显示出相对更高的细胞毒性，而不是其他组织起源的癌细胞。化合物1通过细胞周期蛋白D1的减少和p21的增加介导的G0 / 1停滞显着减弱了细胞的生长。由化合物1处理诱导的细胞凋亡和自噬分别伴随着AKT-BAD途径和AMPK-mTOR途径的调节。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。结果化合物1在人膀胱癌细胞T24和T24R2中显示出相对更高的细胞毒性，而不是其他组织起源的癌细胞。化合物1通过细胞周期蛋白D1的减少和p21的增加介导的G0 / 1停滞显着减弱了细胞的生长。由化合物1处理诱导的细胞凋亡和自噬分别伴随着AKT-BAD途径和AMPK-mTOR途径的调节。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。化合物1通过细胞周期蛋白D1的减少和p21的增加介导的G0 / 1停滞显着减弱了细胞的生长。由化合物1处理诱导的细胞凋亡和自噬分别伴随着AKT-BAD途径和AMPK-mTOR途径的调节。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。化合物1通过细胞周期蛋白D1的减少和p21的增加介导的G0 / 1停滞显着减弱了细胞的生长。由化合物1处理诱导的细胞凋亡和自噬分别伴随着AKT-BAD途径和AMPK-mTOR途径的调节。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。结论我们的结果表明化合物1在人膀胱癌细胞中诱导细胞毒性作用，包括对顺铂耐药的T24R2。化合物1可能是开发有效的抗人膀胱癌抗癌药的候选药物。