DNA四面体纳米结构(DTNs)是一种由四条单链DNA(ssDNA)组成的新型DNA探针自组装平台。 它具有合成简单产量高、结构稳定、精密度高、机械强度高、刚性好等优点。DTNs的三维结构使其能够调节相邻探针之间的分子空间,不仅能够有效消除ssDNA和蛋白质在电极界面上的非特异性吸附,同时也促进了均匀有效的探针自组装层的形成,从而提高传感器的灵敏度和抗干扰能力。
电致化学发光(ECL)免疫法具有高选择性和高灵敏度的优点,因此被广泛应用于疾病标志物,霉菌毒素和有机污染物的检测中。福州大学食品安全与生物分析教育部重点实验室的林振宇研究员课题组联合南京医科大学附属无锡妇幼保健院陈道桢主任将DTNs与ECL免疫法结合,用于检测肝细胞癌的标记物高尔基体蛋白73(GP73)。
在前期的工作中,他们发现电化学信号能够作为一种稳定的内参比信号,通过对电极表面探针修饰不均匀引起的实验结果误差进行校正来提高ECL生物传感器的重现性。因此,他们巧妙地利用DTNs四条边的双链结构,对电化学信号物质亚甲基蓝(MB)进行装载。通过金电极和DTNs的巯基的键合在电极表面引入稳定的内参比电化学信号,构建了一种基于DTNs作为稳定内参比信号载体,利用ECL信号与电化学信号比值定量检测GP73的比率免疫传感器。同时,在该传感器中,DTNs提供了一个高效的生物传感界面,在电极表面进行免疫检测,形成经典的抗体-抗原-抗体三明治夹心结构。修饰在抗体上的Ru(dcbpy)3Cl2在目标物GP73存在的情况下能够富集到电极表面产生ECL信号,实现了GP73的高灵敏检测。
这一研究成果近期发表在Analytical Chemistry 上,第一作者为福州大学博士研究生林悦。
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Ratiometric Immunosensor for GP73 Detection Based on the Ratios of Electrochemiluminescence and Electrochemical Signal Using DNA Tetrahedral Nanostructure as the Carrier of Stable Reference Signal
Yue Lin, Jinpeng Jia, Rui Yang, Daozhen Chen, Jian Wang, Fang Luo, Longhua Guo, Bin Qiu, Zhenyu Lin
Anal.Chem., 2019, 91, 3717-3724, DOI: 10.1021/acs.analchem.9b00013
导师介绍
林振宇
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