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2021-10-15:本组利用稳态和瞬态荧光研究2-氨基嘌呤在核酸传感中的序列选择性的论文被Biosensors & Bioelectronics接收
发布时间:2021-10-15


2-氨基嘌呤2-AP)是一种对环境极其敏感的荧光碱基,已广泛应用于监测核酸的结构、核酸分子构象变化等。在dsDNA中,2-AP的荧光几乎可以被完全猝灭;而在ssDNA中,其荧光可以得到一定程度的恢复。基于此,科学家们构建了众多无猝灭基团标记的荧光生物传感方法。现有研究结果表明:与催化发夹组装(CHA)或杂交链式反应等组装方式相比,利用核酸酶切割2-AP标记探针的方法具有更高的信号放大效率。然而,至今仍然没有对2-AP的标记位点、相邻碱基等对输出信号影响的相关研究报道,这对构建新型高灵敏传感方法造成一定困扰。此外,在一个探针核酸中标记多个2-AP是否是提高生物传感器灵敏度的一种新策略,仍然有待探究。


针对上述问题,本课题组利用稳态和瞬态荧光,详细研究了核酸酶完全释放2-氨基嘌呤核苷,以提高生物传感方法灵敏度的研究。首次证实了核酸酶切割后,2-AP是以高荧光量子产率的单核苷形式存在。并且这种切割过程不依赖于标记位点、邻近碱基序列,极大简化了新型传感设计。此外,后续结果进一步表明,增加探针中的2-AP标记数量,也可以实现灵敏度大幅度提升,但对于未切割的体系,灵敏度无显著变化。为了验证上述结果,本文还设计了一种异构激活的传感策略,并在Exo I酶切后,实现了PDGF-BB高灵敏和高选择性检测,证实了核酸酶切提高传感方法灵敏度的实用性。总的来说,由于2-AP在传感方法中广泛应用,本文的研究结果将对构建新高灵敏的传感方法具有重要参考意义。


相关成果以“Full liberation of 2-Aminopurine with nucleases digestion for highly sensitive biosensing”为题发表在Biosensors and Bioelectronics上。该研究得到了科技部重点研发计划(2019YFE0108200)、四川省国际合作项目(No. 2021YFH0124)和中央高校基本业务费的资助。