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小干扰 RNA 的低效摄取是其无法在科罗拉多马铃薯甲虫细胞中触发 RNA 干扰的原因
Archives of Insect Biochemistry and Physiology ( IF 1.5 ) Pub Date : 2023-07-15 , DOI: 10.1002/arch.22036
Jinmo Koo 1 , Dhandapani Gurusamy 1, 2 , Subba Reddy Palli 1
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使用外源小干扰 RNA (siRNA) 或小发夹 RNA (shRNA) 来触发昆虫 RNA 干扰 (RNAi) 的成功有限。相反,长双链 RNA (dsRNA) 用于诱导昆虫靶基因的敲低。在这里,我们比较了 si/sh RNA 和 dsRNA 在科罗拉多马铃薯甲虫 (CPB) 细胞中的效力。 CPB细胞对dsRNA表现出高效的RNAi反应。然而,si/sh RNA 在 CPB 细胞中触发 RNAi 的效率较低。 Cy3 标记的 si/sh RNA 细胞摄取的共聚焦显微镜观察表明,与 dsRNA 相比,si/sh RNA 的摄取减少。 si/sh RNA 在 CPB 细胞的条件培养基中稳定。尽管数量很少,但当被 CPB 细胞内化时,si/sh RNA 会被 Dicer 酶加工。脂质介导的转染和嵌合 dsRNA 方法用于改善 si/sh RNA 的递送。我们的结果表明,CPB 细胞中 si/sh RNA 的摄取效率低下,导致 RNAi 反应无效。然而,借助有效的递送方法,si/sh RNA 可能成为开发目标特异性 RNAi 介导的生物农药的有用选择。
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