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《Analytical Chemistry》:课题组发现甘油添加剂能够显著增强CRISPR-Cas12a检测效率!
发布时间:2022-05-21

在基于核酸扩增与CRISPR/Cas系统的一管核酸检测方法中,由于CRISPR/Cas体系能识别并降解扩增靶标,导致扩增模板缺失,所以扩增效率大大降低。此外,被靶标核酸激活的CRISPR/Cas系统能够非特异地降解核酸扩增所需的引物,进而导致扩增效率下降。这些因素导致现有的基于核酸扩增与CRISPR/Cas技术相结合的一管方法检测效率低下,不能满足高灵敏的核酸检测要求。为了解决上述问题,很多研究将CRISPR/Cas检测与核酸扩增两个过程分开进行,尽管能实现灵敏度的提升但其检测程序涉及到扩增产物的转移,这容易造成气溶胶污染进而导致假阳性的检测结果。

课题组林梅同学(三年级硕士,已直读博士研究生)发现往CRISPR/Cas12a体系中添加甘油添加剂能够使得核酸等温扩增(RPA)在其扩增指数期不受CRISPR切割影响,从而显著增强了一管的RPA-CRISPR/Cas12a检测体系的灵敏度,这一发现对CRISPR分子诊断技术的发展具有重要意义,为提高CRISPR检测效率、解决气溶胶污染问题提供了一种实用的解决方案。

上述工作于2022.5.16日被国际顶级分析化学刊物Analytical Chemistry接收,并将在近期在线发表。