ROCK抑制通过保留细胞膜CD59和阻断补体激活增强肝细胞定植

【据《Molecular Therapy》2023年2月28日报道】题：ROCK抑制通过保留细胞膜CD59和阻断补体激活增强肝细胞定植（作者：李文林 中国 第二军医大学基础医学部；孙平新 中国 第二军医大学基础医学部；汪超 中国第二军医大学基础医学部）

肝脏是代谢稳态的中心器官。全世界每年约有200万人死于肝病。对于终末期肝病，肝移植是唯一的治疗方法，但其应用受到供体器官短缺和终身免疫抑制需求的限制。除了器官移植，临床前和临床研究还表明，肝细胞移植可能是治疗恶性肝病的另一种有效策略。特别是对于肝脏代谢性疾病，肝细胞移植可以快速改善患者的临床症状，甚至长期缓解病情。肝细胞移植相对于肝器官移植的优点是手术创伤小，并且可以根据需要进行多次移植。然而，也有一些瓶颈阻碍了肝脏疾病的细胞治疗。其中一个主要限制是肝细胞在体内定植的效率极低。细胞移植后不久，高达70%的肝细胞立即丢失，可能是由于即时血液介导的炎症反应（IBMIR）以及凝血和补体途径的激活，导致肝细胞死亡。存活的肝细胞必须迁移穿过肝窦内皮细胞屏障，挤压到肝板中，并建立与宿主肝细胞的细胞间粘附以成功植入。最终，只有大约2%-6%的肝细胞可以植入受体肝脏。因此，需要克服低细胞植入率的问题，才能实现肝细胞移植的临床应用。

该研究团队首先测试了四种化合物，即ROCK抑制剂Ripasudil、非肌肉肌球蛋白II ATP酶抑制剂Blebbistatin、ß1整合素激动剂Pyrintegrin和Src激酶抑制剂Dasatinib对肝细胞移植的影响，结果显示ROCK抑制剂Ripasudil显著增强了肝细胞定植。由于先前的研究表明，补体激活在移植后早期肝细胞损失中起着重要作用，因此研究者分析了Ripasudil是否可以调节补体系统的激活。C5b-9和Zombie Red的免疫染色结果表明Ripasudil治疗通过阻断膜攻击复合物的形成来保护肝细胞。接下来，该团队重点研究了膜攻击复合物抑制剂CD59a在肝细胞上的表达情况。CD59a和C5b-9免疫染色及WB分析结果表明Ripasudil通过稳定细胞表面CD59a来增强肝细胞定植。敲除CD59a后，肝细胞的定植效果明显削弱，并且不能被Ripasudil治疗挽救。最后，研究者发现Ripasudil能加速肝细胞移植后Fah小鼠的肝再殖，并且Ripasudil可以与肝辐照协同作用，进一步改善肝细胞定植。

综上所述，该研究发现肝细胞分离导致细胞膜补体抑制分子的降解是诱导肝细胞移植后被机体快速清除的主要原因，抑制ROCK可维持肝细胞膜蛋白的完整性、阻断膜攻击复合体的组装、并显著提高肝细胞移植后的定植效率。此外，该研究中使用的ROCK抑制剂为上市药物Ripasudil，具有快速转化为促进肝细胞移植治疗药物的潜力。该研究揭示了移植后早期肝细胞损失的新机制，并提供了通过抑制ROCK来增强肝细胞移植的有效策略。

（同济大学附属东方医院再生医学研究所 郭娜 何志颖 编译）