西南大学袁若教授实验组基于自组装的树枝状DNA四面体,提出了一种新颖的固载体系用于构建电致化学发光(ECL)适体传感器用于脂多糖(LPS)的超灵敏检测。袁若教授实验组将经典的DNA双链嵌插剂多柔比星(Dox)和电致化学发光试剂N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺(ABEI)通过交联作用连接在同一分子内,形成新型的电致化学发光指示剂(Dox- ABEI)。该分子即保持了ABEI的高的发光效率,又能够以非共价键的形式通过嵌插作用负载于DNA双链上。然后通过逐代添加、逐步组装的过程,自组装合成了树枝状DNA四面体结构为纳米载体,用于固载Dox-ABEI发光指示剂,实现了Dox-ABEI简单、高效的固载。
图1. Dox-ABEI复合物的合成路线
通过LPS与其适体的特异性结合作用,将LPS的含量转换为DNA含量输出,在电极表面通过DNA催化自主装技术(CHA)实现目标DNA的循环,用于增强ECL适体传感器的灵敏度。并且,通过链霉亲和素(SA)和生物素的特异性作用,将嵌入了大量Dox-ABEI的树枝状DNA四面体结构固载于电极表面,在检测底液中测试构建的ECL适体传感器的发光强度用于指示LPS的浓度。通过结合树枝状DNA四面体对Dox-ABEI超强的固载能力,ECL固有的灵敏度高的优势以及目标物循环策略对信号的放大作用,所构建的方法对LPS的检测限达到了0.18 fg/mL。
图2.(A)树枝状DNA四面体结构(G2)-Dox-ABEI复合物的制备方法;(B)ECL传感器的制备过程及检测原理。
这一研究成果发表于《Analytical Chemistry》上。
http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.6b00276
原文:Ultrasensitive Lipopolysaccharides Detection Based on Doxorubicin Conjugated N-(Aminobutyl)-N-(ethylisoluminol) as Electrochemiluminescence Indicator and Self-Assembled Tetrahedron DNA Dendrimers as Nanocarriers
Anal. Chem., 2016, 88, 5218-5224, DOI: 10.1021/acs.analchem.6b00276